欢迎来到专业的体外诊断原材料信息平台

当前位置> 首页> 技术文章>

关于IgE检测(膜条)检测方法的探讨

前期我主要针对Phadia的荧光试剂进行了详细的介绍,今天我想对欧蒙的IgE检测试剂做个大概的介绍,同时列举一些国产试剂来说明。
欧蒙大多数人都知道,主要的业务就是自身免疫和过敏原检测这一方面,他们的营收还是偏向于自身免疫疾病的检测,针对于过敏原IgE检测,技术上跟Phadia还是有差距。不过他们的膜条法的IgE检测试剂在国内的市场占有率也算是相对较高的,所以我们今天针对于膜条法的试剂做一个大致的说明。
膜条法以我个人的理解,应该指的是免疫层析免疫印记或者两者结合,目前目前市面上偏向于免疫印迹的更多,比如欧蒙、浩欧博、浙大迪讯、深圳博卡等等,目前有胶体金层析的好像国内有证的目前只有新华联协和一家。究其原因,我觉得可能主要是以下原因:IgE在人体的含量很低,所以对灵敏度的保障显得尤为重要,免疫印迹方法基于反应时间长,显色更加灵敏,所以可能更容易被采用。免疫层析对于IgG和IgM的检测问题不大,对于IgE的检测,就得在检测模式上下点功夫。
先来看一下欧蒙的印迹法试剂,如下图。

欧蒙的试剂就包被方式而言,其实跟胶体金层析是非常类似的,他们将把变应原以划线的形式包被于膜上(2-4条/小块,每条代表不同的变应原),然后将各个小膜块从上到下依次粘贴于塑料材质上,反应的时候,将该膜条置于反应槽内进行一列的反应,如下图:

他们的反应模式可以是手工操作,也可以是仪器自己操作。我这里描述一下全自动仪器的操作步骤:
  1. 膜条置于反应槽,+1mL通用缓冲液,5min后吸干;

  2. 样本稀释11倍(150uL+1.5mL样稀),室温过夜温育;

  3. 清洗3次,每次5min,吸干;

  4. +1mL酶结合物,摇床上室温温育60min;

  5. 清洗3次,每次5min,吸干;

  6. +1mL底物,摇床上室温温育10min;

  7. 清洗3次,每次1min,风干,判读。

注释:酶结合物一般为碱性磷酸酶标记的小鼠抗人IgE;

          底物一般为(NBT/BCIP)。

国内目前与欧蒙做的比较像的应该是深圳博卡的产品,见下图:

线性免疫印迹法,应该指的就是类似欧蒙的这种方法。
我们再来看一下浙大迪讯的产品:

浙大迪讯的产品与欧蒙不同的是,欧蒙是线,他们是点。抛开性能不谈,只说设计的话,我倒是挺喜欢浙大迪讯的设计,如果他们把反应槽设计的能嵌入到比色卡去比对,我觉得使用会更加便携一些。

下面再看一下浩欧博的试剂:

浩欧博是把变应原包被在了一个一个的正方形小纸片上,然后从上至下依次粘贴在了PVC板上(上图中的黑色线条是我画的,为了区分各个小方块)。据说浩欧博目前的这类产品在国内的市场占有率也有一定份额,但是我个人觉得这个设计其实一般。

下面再看一下新华联协和药业的胶体金产品:

我个人觉得,如果在变应原原料和免疫层析的反应模式上多下点功夫,使得灵敏度有所保证的话,其实免疫层析在操作便捷性方面有免疫印迹不可替代的优势。既然Phaida能做成功,那么其他企业也可以。

来源:IVDdiagnosis

声明:本平台注明来源的稿件均为转载,仅用于分享,不代表平台立场,如涉及版权等问题,请尽快联系我们,我们第一时间更正,谢谢!



返回顶部