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汇总:凝血项目检测方法比对、临床意义

凝血检测

1、凝血检测的方法及比较

血凝检测的主要方法有三种:凝固法、发色底物法和免疫比浊法。检测得到的指标对应着临床上的各类疾病,通过对患者血浆中相应指标的检测,实现对特定疾病的早期诊断。

目前,凝固法是最常使用的血凝检测方法,它是根据血浆凝固过程中特定属性的变化来测定凝血功能。根据观测属性的不同,凝固法又可分为光学法和磁珠法,如果应用光学原理检测浊度的变化则属于光学法,应用磁珠运动检测黏度的变化则属于磁珠法(一种机械法测量)。其中,光学法血凝检测更为常见,其仪器制造成本也更低。而磁珠法血凝检测主要面向高端市场,其检测样本量可以比光学法血凝检测的试剂用量更低,并且不受样品的光学异常、加样中的气泡等影响,大大节约试剂用量并提高检测结果的准确度。

发色底物法是通过测定产色底物的吸光度变化来推测所测物质的含量和活性的,该方法又可称为生物化学法。其原理是通过人工合成与天然凝血因子有相似的一段氨基酸排列顺序、并含有特定作用位点的小肽,并将可水解产色的化学基因与作用位点的氨基酸相连。测定时由于凝血因子具有蛋白水解酶的活性,它不仅能作用于天然蛋白质肽链,也能作用于人工合成的肽链底物,从而释放出产色基因,使溶液呈色。产生颜色的深浅与凝血因子活性成比例关系,故可进行精确的定量。

免疫比浊法是将被检物与其相应抗体混合形成复合物,从而产生足够大的沉淀颗粒,通过透射比浊或散射比浊进行测定。此法操作简便,准确性好,便于自动化。

目前,血凝检测的两大行业巨头沃芬和希森美康主要采用的都是光学法血凝检测,不同于这二者,思塔高主要采用的则是磁珠法血凝检测,瞄准的是高端检测市场。

2、凝血检测常规指标及临床意义

各类仪器分别与配套的检测试剂共同使用,供临床对血液凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(DD)、纤维蛋白(原)降解产物(FDP)、抗凝血酶III(AT-III)等指标进行定量分析。

常规凝血四项检测(PT、APTT、TT、FIB)是检测凝血功能的常用方法,可用于术前出血风险筛查,是手术前必查项目,目的是术前了解患者的凝血功能障碍情况,防止患者出血不止导致手术发生意外。此外它还是检查血栓性疾病的首选方法。


DD检测可以对血栓风险进行评估,指导对心脑血管疾病的预防过程,有利于心脑血管疾病患者的“早诊早治”,降低高危人群发病风险。FDP主要反映纤维蛋白(原)的溶解功能。在纤维蛋白原大量被分解所引发的原发性纤溶亢进发生时,FDP含量明显升高。在高凝状态、肺栓塞、恶性肿瘤、静脉血栓、溶栓治疗等所致的继发性纤维亢进时,FDP含量亦升高。DD和FDP二者结合可以明显地提高高凝状态和血栓疾病的阳性检出率及阴性排除率;并具有较高的特异性和敏感性,应用于临床可达到简便、快速、敏感、实用的目的。


AT-Ⅲ是抗凝系统中最重要的成分,它由肝脏合成,为一种多功能的丝氨酸蛋白酶抑制物,可抑制凝血酶生成具有强大的抗凝活性占血浆抗凝酶活性的70%。某些出血性情况,如血友病、再生障碍性贫血、心瓣膜病(心力衰竭肝肿大者)AT-Ⅲ活性增高。抗AT-Ⅲ活性减低见于弥漫性血管内凝血(DIC)、肝硬化、败血症、血栓形成性疾病(心肌梗塞,静脉血栓形成等),先天性AT-Ⅲ缺陷,口服避孕药。



正常参考值

临床应用

凝血酶原时间(PT

9-15秒

凝血酶原时间是检查外源性凝血因子的一种过筛试验,是用来证实先天性或获得性纤维蛋白原、凝血酶原、和凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ的缺陷或抑制物的存在,同时用于监测口服抗凝剂的用量,是监测口服抗凝剂的首选指标。据报道,在口服抗凝剂的过程中,维持PT在正常对照的1-2倍最为适宜

活化部分凝血活酶时间(APTT)

21-37秒

活化部分凝血活酶时间(APTT)是检查内源性凝血因子的一种过筛试验,是用来证实先天性或获得性凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ的缺陷或是否存在它们相应的抑制物,同时,APTT也可用来凝血因子Ⅻ、激肽释放酶原和高分子量激肽释放酶原是否缺乏,由于APTT的高度敏感性和肝素的作用途径主要是内源性凝血途径,所以APTT成为监测普通肝素首选指标。

凝血酶时间测定(TT)

10-20秒

被检血浆凝血酶时间比正常对照延长3s以上即为异常。

凝血酶时间延长:见于肝素增多或类肝素抗凝物质存在、如SLE、肝病、肾病等,低(无)纤维蛋白血症、异常纤维蛋白原血症、纤维蛋白原降解产物(FDP)增多、如DIC、原发性纤溶等。

凝血酶时间缩短:见于血标本有微小凝块或钙离子存在时。

纤维蛋白原(FIB

2—4g/L

纤维蛋白原即凝血因子Ⅰ,是凝血过程中的主要蛋白质,FIB 增高除了生理情况下的应激反应和妊娠晚期外,主要出现在急性感染、烧伤、动脉粥样硬化、急性心肌梗死、自身免疫性疾病、多发性骨髓瘤、糖尿病、妊高症及急性肾炎、尿毒症等,FIB减少主要见于DIC、原发性先溶亢进、重症肝炎、矸硬化和溶栓治疗时。凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原三者同时检测已被临床用于筛查病人凝血机制是否正常,特别是心胸外科、骨科、妇产科等手术前检查病人的凝血功能尤为重要。


D二聚体测定(DD

0.00-0.55mg/L

D-二聚体测定是诊断活动性纤溶较好的指标,对血栓形成性疾病如弥漫性血管内凝血(DIC)、深静脉血栓形成、脑血管疾病、肺栓塞、肝脏疾病、恶性肿瘤、外科手术后、急性心梗等疾病均有重要的诊断价值,同时D-二聚体检测还可用于溶栓药物的治疗监测指标。

纤维蛋白(原)降解产物(FDP

0-5mg/L

增高见于原发性纤溶和继发性纤溶(DIC、恶性肿瘤、急性早幼粒白血病、肺栓塞、深静脉血栓形成、肾脏疾病、肝脏疾病、器官移植排斥反应、溶血栓治疗等)。

抗凝血酶Ⅲ(AT-)

活性:80%-120%

AT-Ⅲ是结合凝血因子最主要是凝血酶原的抗体,而肝素的作用是放大AT-Ⅲ的活性,如果AT-Ⅲ减少或缺失,那么肝素做抗凝治疗就不会有太大效果,血栓就会增多。AT-Ⅲ主要用于易栓症及肝素抗凝治疗监测。

病理性增高:表明血液抗凝活性增强,主要见于口服抗凝药、以及急性出血期等。

病理性降低:先天性AT-Ⅲ缺乏症;血栓前状态和血栓性疾病时,血液抗凝作用减弱,如DIC高凝期、心肌梗死、心绞痛、脑血管病变、妊娠症、深静脉血栓形成、肾病综合征等;合成减少,如严重肝病等。



信息来源:锐翎资本、IVD学习笔记

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