当有足够的容量时，可以使用单个患者标本进行配对差异检测。在许多情况下，需要准备一批患者标本，以便有足够的量来进行干扰检测。

准备好基础混样，如下所示：

1.   考虑到测量程序的样品量、待测的潜在干扰物质数量以及所需的复测次数，计算出所需的样品量。

2.   获取适当的标本（如全血、血清、血浆、尿液），这些标本应是无渗漏、无杂质、无溶血的，来自几个没有服用药物或其他补充剂的健康人。标本应尽可能地反映出通常用于相关被测量的标本基质。

首选的标本来自患者，其采集、运输和储存的条件应符合被评估的测量程序的使用说明。必要时，可以验证比使用说明中规定的时间更长的储存时间是可以接受的。

当无法获得首选标本时，可以考虑其他标本类型，如冻干标本、经过处理的控制材料或从合适的原材料中提取的标本，以模拟个别患者的标本，但要适当谨慎。

这样的其他标本类型可能有一个相对于要测量的人类标本的基质被改变。加工过的控制液可能含有防腐剂和稳定剂以及不现实的被测量组合。因此，这种类型的样品可能会表现出与真实人体标本不同的干扰效应。

评估人员负责验证检测材料是否能充分模拟真实的人体标本，EP14和EP30可用于此目的。

3.   在保持标本完整性的条件下，通过合并各个标本或样品来准备基础混样，并将其混合后搅拌均匀。

4.   确定基础混样中被测量的浓度。避免将其他物质与被测量一起引入。建议的被测量浓度见《干扰检测中使用的被测量浓度》。

5.   将基础混样分成单独的小标本（基础混样的等分小样），用于检测每种浓度的被测量。通过添加分析物和补偿可能存在的任何内源量，将每个独立子混样中的被测量浓度调整到所需的被测量浓度。

注1：当同时使用被测量和干扰物质进行加标时，会出现基质效应的变化。

注2：当不可能添加分析物（例如，抗体）时，可以接受用待测物浓度的真实患者样品来准备每个混样。

在检测潜在的干扰物质时，应使用可行的最高纯度的材料进行添加。当使用纯度较低的材料时，除了预定的物质外，其他物质可能会造成观察到的干扰。

按以下方法制备每种潜在干扰物质的贮存液：

1.   获得潜在干扰物质的适当纯度形式，或最接近体内循环形式的形式。当使用医药级制剂时，请记住它们可能含有辅料、防腐剂、杀菌剂、杀真菌剂、抗氧化剂、着色剂、调味剂、金属氧化物、反离子和填料，其中任何一种都可能是观察到的效果的真正原因。

2.   选择潜在干扰物质具有足够溶解度的溶剂。检查适当的参考资料，了解潜在干扰物质在这些溶剂中的溶解度。确认该溶剂不会对评估中的测量程序造成干扰。一些可能的溶剂，按照一般偏好的顺序列出，包括：

• 试剂级水（详见GP40）；

• 一种水基缓冲液；

• 稀释的盐酸或NaOH；

• 乙醇或甲醇；

• 丙酮；

• 二甲基亚砜；

• 其他有机溶剂。

有机溶剂需要特别考虑。挥发性的溶剂应该得到保护，防止蒸发。许多有机溶剂在水中的溶解度非常低，或者会通过影响样品、试剂或反应本身而引入伪影。由于氯仿的溶解度低，在血清中至少需要1:100的稀释。

注：高值溶剂可能导致蛋白质沉淀。

3.   在溶解度允许的情况下，尽可能少地稀释样品基质，最好不超过5%，方法是制备至少是预定检测浓度20倍的浓缩原液。

4.   彻底记录贮存液的制备过程。

检测标本：如图1所示，检测标本的制备方法是将干扰物质贮存液加入到每个待测物浓度基础混样的等分小样中。

对照样品：如图2所示，对照样品的制备方法是将用于干扰物质贮存液的相同溶剂（不含干扰物质）等量的加入与用于制备检测标本的等分小样中。

* 流程图中使用了四个基本符号：六边形（表示一个流程的开始），箭头（连接流程活动），方框（指定流程活动），椭圆形（表示一个流程的开始）。

图1 | 检测和对照样品的制备过程概述*

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来源： 诊断科学