① 软件在进行基线自动扣除的时候出现错误，引起了扩增曲线抬升； ② 选用的耗材、试剂或者操作的原因，导致背景荧光信号有所波动，造成反应孔的自动基线扣除错误； ③ 探针浓度过高，体系中有荧光物质污染，扩增效率低。
解决方案
① 采取手动调整基线的方法，重新定义基线即可正常（即将基线起点改为荧光信号稳定的循环数，基线终点设置成扩增曲线起峰的前一个循环数）； ② 重新提取样本、重新配置试剂（可采用不同厂家试剂检测），注意人员操作； ③ 稀释模板重新扩增。 2、扩增曲线不平整，有向上或者向下的尖峰
原因分析
① 仪器不稳定导致的扩增曲线异常（也可能突然停电或者电压不稳）； ② 尖峰向下，可能是卤素灯老化所致发射光源不稳定（指卤钨灯光源的激发器）； ③ 尖峰向上，考虑仪器或者孔位问题，还要考虑反应体系是否存有气泡。
解决方案
① 检查仪器性能，检查实验室电压情况； ② 定期仪器保养维修，避免配件老化问题出现； ③ 检查问题孔位，排除孔位问题； ④ 配制反应体系，分装避免产生大量气泡，模板加完，微孔板离心再扩增。 3、扩增曲线末尾起跳
原因分析
① 阴性对照曲线末尾起跳，表示存在交叉污染； ② 复检样本，排除非特异性扩增的可能性； ③ 正常样本曲线末尾起跳，怀疑模板存在交叉污染；或者样本浓度低、加样量不准确导致扩增效率低； ④ 所用的试剂设计不合理，或存在交叉污染，或操作环境中有气溶胶造成污染。
解决方案
① 检查阴性对照是否存在污染； ② 复检样本，如果复检后曲线为阴性直线则说明之前的末尾起跳为非特异性扩增，如果复检后曲线与之前一样末尾起跳则表示该样本中待检病毒核酸的浓度偏低； ③ 更换试剂，建议使用不同厂家试剂比对； ④ 对操作环境进行处理或更换新的环境、加样器、枪头以及所有的引物、试剂等。 4 、扩增曲线分布混乱
原因分析
荧光波长范围存在重叠，影响PCR检测通路采集荧光信号。
解决方案
进行荧光补偿，再分析可正常。 5、扩增曲线扩增不完整
原因分析
① 模板污染导致降解，或者样本浓度低、加样量不准确导致扩增效率低； ② 模板浓度太高，或者存在抑制成分； ③ 荧光染料浓度低，或者仪器问题荧光收集异常； ④ Taq酶无活性或活性降低； ⑤ 试剂配制没充分混匀，分装不均匀。
解决方案
① 重新提取样本，排除提取效率变低、加样量不足等因素； ② 稀释模板，重新扩增； ③ 检查试剂，更换新试剂，双试剂检测； ④ 试剂配制充分混匀，分装准确； ⑤ 检查仪器。 6、扩增曲线压低
