分析前
导致 CT 值变化的各种分析前环节，包括患者准备、生物差异、标本类型以及运输和储存（表 1）。
表1.影响分析前CT值的因素 | |
|---|---|
| 因素 | 解释 |
| 患者准备 | 在前鼻孔、中叶或鼻咽收集之前不去除多余的粘液，或在吃完食物之后未做漱口，都可能导致CT不准确的结果。 |
| 暴露和标本采集之间的时间 | 如果采集标本太早（例如暴露后前 3 天内）或太晚（例如症状发生后 ＞7 天），则可以得出假阴性结果。 |
| 标本收集有效率 | 不规范的标本采集可能导致结果不准确 |
| 生物差异 | 左右鼻孔、一天中的时间、患者年龄和生物地理祖先 （BGA） 之间的差异也会影响结果 |
| 媒介 | 结果可能因介质而异（例如干拭子、PBS、病毒运输介质、通用运输介质） |
| 标本类型 | 结果可能因标本来源、取样部位而异（例如鼻拭子、咽拭子、唾液、痰等） |
| 运输和储存 | 运输条件和温度可能会影响结果 |
| 标本年龄 | 应定义标本稳定性。如果收集和测试之间的时间超过稳定窗口，结果可能不准确 |
分析中
影响实际检测期间 CT 值的因素包括提取效率、荧光探针选择和试剂批次差异（表 2）。
表2. 影响分析中CT值的因素 | |
|---|---|
| 因素 | 解释 |
核酸回收效率 （非萃取方法） | 缺乏浓缩能力，潜在的抑制和基质效应会影响结果 |
核酸提取效率 （提取方法） | 不同程度的萃取效率和基质效应会影响结果 |
| 抑制检测 | 没有可用的对照来检测检测抑制可能产生假阴性结果或假高CT值 |
基因目标 （多个与单个） | CT值可能因基因靶点及其不同的放大动力学而不同，导致相同或不同标本的结果差异 |
| 荧光检测设计 | 用不同荧光团标记同一基因靶点的探针将增加结果的可变性 |
| 变异的影响 | 引物/探针的结合可能会受到变异的影响，导致CT值的改变 |
| 定义周期阈值 | 根据CT阈值的定义(例如，使用固定于CT值的校准器)或阈值的计算(例如，手动vs.自动化)，可能会出现假阳性和阴性结果。 |
| 认证参考物质 | 缺乏认证的参考物质，如校准器，使得确认结果的准确性和验证作为定量LDT的分析具有挑战性 |
| CT值的平台差异 | 平台有不同的敏感性和截止值。没有建立国际单位。因此，结果无法跨平台标准化 |
| CT值范围可靠性 | 由于缺乏准确性，不应报告线性范围以外的CT值 |
| 试剂批间差 | CT值可能因试剂批次而异。除非新试剂批次是用校准过的或先前描述过的材料来验证的，否则变化的程度是未知的 |
| 人员和操作误差 | 结果可能会因操作人员和一天中的时间而不同，特别是手动方法 |
分析后
在分析后的过程中，除检测靶标、可报告单位和检测目标等因素外，CT值还会传递给医疗保健提供者(表3）。
表3.影响 检查后CT值的因素 | |
|---|---|
| 因素 | 解释 |
| 检测目的 | CT值的解释和使用取决于检测目的，如筛查、监测、诊断、监测、复工、术前、出院管理、传染性等 |
| 检测顺序 | 不鼓励用不同的基于pcr的检测方法纵向监测给定的患者，因为分析之间的可变性 |
| 传染性与病毒检测 | 病毒检测不等于传染性。表明感染病毒的CT值范围需要通过细胞培养研究确定。 |
| 患者具体因素 | 免疫和/或接种疫苗情况可能会影响CT值的效用 |
| 可报告单位 | CT(周期数)、ng/uL、TCID50/mL、基因组拷贝数/mL、RNA NAAT检测单位(NDU)/mL之间缺乏相关性，可能使结果解释复杂化 |
| 手动操作 | 手工方法更容易出现错误(例如，数据输入错误)，特别是在没有遵循质量步骤的情况下 |
| 趋势 | 对于意外变化(即CT相对于其他测量值的显著变化)缺乏LIS或质量标志可能会影响结果 |
| 再感染/复发 | 可能发生相同或不同变异的继发性感染，CT值的解释尚不清楚 |
| 检测目标 | PCR-靶标丢失/靶标序列变异的初始和重复试验可能不一致 |
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资料来源：原博士带你做检测
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