1、细菌性呼吸道感染
肺炎是一种肺部炎症,在世界范围内引起严重的发病率和死亡率。肺炎的实验室调查包括显微镜检查、培养、细菌鉴定、抗生素灵敏度、血清学和分子技术。
痰液采样是一种快速有效的培养特定菌株的方法,是一种非侵入性的、相对低成本的技术。然而,它的灵敏度很低(35 ~ 60%),读者之间的差异性很大。此外,约30 ~ 40%的社区获得性肺炎患者不产生痰液,因此识别感染性细菌菌株更成问题。
某些细菌抗原,如肺炎球菌和军团菌,可以通过尿液分析检测,并提供另一种非侵入性的简单测试来识别特定的感染。
检测细菌尿液抗原比大多数实验室通常使用的痰液革兰氏染色法和培养法更加敏感和特异。结果可以立即得到,甚至在开始抗生素治疗后仍然有效。下面将讨论用于鉴定一些主要的细菌性肺炎感染的免疫检测。
1.1、链球菌肺炎
肺炎链球菌,俗称肺炎球菌,是社区获得性肺炎的最常见原因,是大多数需要住院治疗的呼吸道感染的罪魁祸首。肺炎球菌的细胞壁成分可在各种体液中检测到,包括血液、痰液和尿液。肺炎球菌的尿液抗原可以用免疫层析尿液检测法检测,其灵敏度为70 ~ 90%,特异性为80 ~ 100%。
对门诊抗生素治疗失败、需要重症监护、有酗酒史、白细胞计数低、脾脏衰竭以及有胸腔积液的患者建议使用肺炎球菌抗原检测。一些血清型,包括3、6A、6B、9N和19F,与患者的预后较差有关。由于肺炎球菌的耐药性在全球范围内不断增加,使用快速检测方法识别耐药菌株将成为治疗这种疾病的优先事项。
1.2、军团菌种类
军团菌是社区和医院获得性肺炎的一个常见原因。它被称为军团菌病,表现为干咳前的「流感样」症状,对免疫力低下的病人尤为重要,因为他们的感染最为严重。军团病通常是通过测定嗜肺军团菌的尿液抗原而不是通过直接荧光抗体(DFA)染色或培养来诊断的。
尿液抗原检测是一种酶免疫检测,对军团病的特异性高达 > 99%,灵敏度为70 ~ 80%。这种试验的主要缺点之一是它只适用于诊断嗜肺军团菌的第1组血清群。尽管如此,这个血清组占社区内获得的军团病的80%。
1.3、支原体肺炎
支原体是最小的自由生活的生物体。肺炎支原体通常引起上呼吸道感染;但是,它也是肺炎的常见原因。肺炎支原体通常通过基于IgM和IgG的血清学检测来检测。
感染后约7至9天,抗体滴度开始上升,3至4周后达到峰值。酶联免疫检测(EIA)技术的灵敏度为97.8%,特异性为99.7%。EIA的阳性结果最好通过比较相隔两到三周的急性期和恢复期血清来确定。
一般来说,配对血清的滴度增加4倍或更多就表明有感染。新的抗原免疫检测已经被开发出来,最好用于检测呼吸道分泌物中的肺炎双球菌;但是,它们在很大程度上已经被基于聚合酶链反应的检测所取代。
1.4、流感嗜血杆菌
流感嗜血杆菌是一种革兰氏阴性细菌,有包被和非包被两种形式。最重要的血清型是流感病毒血清型b(Hib),在儿童使用Hib结合疫苗之前,它是细菌性脑膜炎的常见原因。流感杆菌的临床诊断通常通过细菌培养、聚合酶链反应(PCR)或基于抗体的乳胶颗粒凝集试验(LAT)进行。
LAT是一种比培养更敏感的检测流感病毒的方法,因为这种方法依靠的是抗原而不是有活力的细菌,因此,其结果不受之前使用抗生素的影响。
1.5、衣原体肺炎
肺炎衣原体是一种强制性的细胞内细菌,它有一个复杂的生长周期,包括基本体(EB)和网状体(RB)。细菌的繁殖发生在细胞内的RB阶段,然后恢复到具有传染性的EB,并在环境中存活。
肺炎杆菌的血清学检测缺乏对该生物体的灵敏度和特异性,因为血清学检测结果为阳性,可以表明目前或过去的感染。直接抗原检测(DAT)和聚合酶链反应(PCR)似乎是诊断肺炎球菌肺炎的最有希望的进展。
2、真菌性呼吸道感染
2.1、曲霉菌
过敏性支气管肺曲霉病(ABPA)是由肺部对烟曲霉菌的超敏反应引起的。在早期阶段,过敏反应引起支气管收缩,随着时间的推移,可导致衰弱的肺部疾病,如支气管扩张和纤维化。
ABPA的诊断基于一些主要的诊断特征,包括哮喘病史、胸部X光片上的肺部浸润、皮肤测试对曲霉菌抗原的反应性、嗜酸性粒细胞计数升高和一系列不同的基于免疫测定的测试。这些免疫测定包括测量烟曲霉的沉淀抗体、升高的血清IgE浓度和升高的特异性血清IgE和IgG抗体。
初步评估包括ABPA的皮肤点刺试验。如果该试验被认为是阳性的,则对血清IgE和天疱疮沉淀物进行检测。如果血清IgE浓度>1000 ng/mL,同时沉淀物试验和烟曲霉抗体(IgE和IgG)呈阳性,则表明可能诊断为ABPA。
3、病毒性呼吸道感染
3.1、甲型和乙型流感
流感是全世界呼吸道疾病的一个主要原因,也是社区获得性肺炎最常见的病毒性原因。在动物体内循环的流感病毒对人类健康构成重大威胁,近年来的甲型H1N1流感(猪流感)感染就说明了这一点,世界卫生组织(WHO)在2009年将其宣布为国际关注的公共卫生紧急情况。
4、囊性纤维化
囊性纤维化(CF)是最常见的威胁生命的常染色体隐性疾病之一,主要影响高加索人群。它是由7号染色体上的囊性纤维化跨膜传导调节器(CFTR)基因突变引起的,该基因导致外分泌组织中氯离子通道功能失调的表达。这种缺陷导致氯和钠在上皮细胞中的运输异常,从而形成粘稠的分泌物,影响肺、胰腺、肝脏、肠道和生殖道。
最终,由于肺部粘稠分泌物的增加促进了细菌的定植,因此,渐进性肺部疾病是CF患者发病和死亡的主要原因。
CF的诊断是基于生化和基因检测。氯化汗液试验是实验室确认的主要方法。该试验采用皮洛卡平离子透入法,然后对分泌物进行化学分析。诊断为CF需要氯化物浓度 > 60 mmol/L。
少量的干血样现在被常规用于新生儿的CF筛查,可以识别大约95%的CF病例。这种检测是基于对免疫活性胰蛋白酶(IRT)水平升高的检测,可以通过放射免疫法或酶联免疫法进行定量检测。
5、肺栓塞和D-型血
肺栓塞(PE)是肺部一条或多条动脉中的血栓,通常由骨盆或腿部的静脉血栓引起。D-二聚体是血栓的降解产物,可以作为诊断肺栓塞的辅助手段。尽管D-二聚体具有良好的灵敏度和阴性预测值,但其特异性和阳性预测值较差。
D-二聚体水平升高并不能诊断为PE,因为D-二聚体在肾衰竭、恶性肿瘤以及最近接受过手术和住院的病人中也会升高。已经开发了多种免疫检测方法来测量D-二聚体,包括快速ELISA方法。
D-二聚体水平 > 500 ng/mL被认为是有意义的;但是,在解释D-二聚体值之前,必须确定患者形成血栓的风险因素,即测试前的概率,这一点很重要。虽然在测量D-二聚体水平时使用了多种检测方法,但有证据表明,通过定量ELISA或半定量乳胶凝集法,D-二聚体水平 < 500 ng/mL可以排除低至中度PE风险患者的PE。
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来源: 诊断科学
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