对于抗体检测项目,有一种检测模式是如下所示的(以新冠为例):

这种检测模式我不知道有多少厂家在用,我个人觉得其实是存在诸多弊端的。比如,正常人血清中的IgG含量为7-16mg/mL,这是相当大的一个含量,如果血清不稀释直接上样的话,胶体金标记的那点鼠抗人IgG根本是不够用的,直接就hook了。但是如果是稀释的话,尤其是成百上千倍的稀释,有效的IgG能否还能测试出来,那就不好说了。而且对于这种检测模式,我不知道大家注意没有,即使是测试阴性血,不同的人测试出来,C线有明显的深浅不一的情况!尤其是到了医院里样本量上去了,总是被投诉C线出线较浅或根本不出线,这是为什么呢?

根据图片我们看一下,如果血清中人IgG含量较低的时候,血清中的人IgG与胶体金上的鼠抗人IgG结合的比较松散,留有足够多的空间可以和C线上面的羊抗鼠去结合,所以这时候的C线应该还可以出的比较深;血清中的人IgG一旦量足够多,那么人IgG几乎就把胶体金上标记的鼠抗人IgG覆盖掉了,几乎留不出多余的空间可以和C线的羊抗鼠去反应,所以这时候的C线就出的很浅,甚至不出。由于不同的人血清中IgG的含量是不同的,所以就导致了C线的忽深忽浅。我们如何能够保证C线比较稳定呢?——独立C线。现在很多厂家都推荐自己的鸡IgY和羊抗鸡做配对去制备独立C线,使得C线相对于整个系统相对独立,不受干扰。这个想法是可以的,但是使用的时候要有技巧,不能过分的独立,否则你的C线对于你的conjugate(鼠抗人IgG-胶体金)就没有了质控意义了。通常的做法就是用鸡IgY当作封闭抗体用,尤其是对于定量试剂,这种做法是可以增加你的检测上限的。另外在这里需要说明的是,鸡IgY的使用效果可能并没有销售厂家宣贯的那么好,也会有产生假阳的时候,在这种情况下,鸡IgY可能还没有鼠抗兔、鼠抗羊之类的好用,这个就要看自己项目的具体情况了。另外,独立C线的引入是要增加试剂成本的,对于本就不怎么赚钱的项目,再考虑一下吧。来源:IVDdiagnosis
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