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干货 | 限制性内切酶知多少?

何谓限制性内切酶?


限制性内切酶是一种能够识别双链DNA分子中特定核苷酸序列,并在特定位置切割DNA链中的磷酸二酯键的一类酶,简称限制酶。

不同的限制性内切酶会识别不同的DNA序列,它可以在识别序列内或距识别序列不远的位置处切割DNA,酶切之后会形成不同类型的产物,如下图中的BamHI形成5’粘性末端产物,KpnI形成3’粘性末端产物,EcoRV形成平末端产物。


▲ BamHI、KpnI、EcoRV酶切示意图


众所周知,限制性内切酶最常用于分子克隆实验中。但除了克隆,它还可以应用于疫苗研发生产、基因测序、SNP鉴定、ddPCR等领域。


限制性内切酶的命名规则


限制性内切酶的命名主要是根据细菌的属名、种名、菌株或血清型、发现的顺序而定,以BstEII为例,命名规则如下表所示:
表1:限制性内切酶的命名规则


限制性内切酶的分类



根据结构的复杂程度、作用方式与辅因子的区别,限制性内切酶可分为四大类,以下内容总结了各类的特点和典型酶种:


除了以上分类,根据识别和切割位点的异同可以分为3类,如下表所示:
表2:同裂酶、异列酶和同尾酶对比



来源:翊圣生物

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