一、光电倍增管(PMT)
PMT可以将微弱荧光信号转换成电信号并进行放大的真空电子器件。其工作原理为:当光阴极接收到荧光信号时向真空中发射出光电子,进入多个串联的倍增系统,倍增后的电子从阳极被收集以光电流方式输出。
PMT具有极高灵敏度,通常放大倍数可达
图2、光电倍增管
虽然PMT具有较多优点,但是信号线性度差、体积相对较大、价格昂贵的缺点限制了其在便携式核酸检测系统中的应用。虽然可以通过单个PMT对各个通道扫描实现多通道检测,但是增加了需要移动的机械装置,不利于仪器集成化。
二、光电二极管(PD)
PD可将荧光信号转换为电信号的半导体器件,与普通半导体二极管类似,其核心为PN结,但该PN结具有光敏特性。在反相电压作用下,无外界光照时PN结处于截止状态,电流非常微弱称之为暗电流;有荧光信号时,反向电流随之增大,可达几十微安,称之为光电流。荧光信号越强,光电流也越大。
图3、光电二极管
光电二极管与PMT相比,虽然感光面积小、内部通常无增益或增益较小(雪崩光电管的增益一般为100-1000)导致灵敏度相对低,但其具有信号响应线性度良好、量子效率高、响应频率宽、外形小巧、价格实惠等优点,因而越来越多的被应用于荧光检测仪器中,尤其是便携式设备中。
三、电荷耦合器件(CCD)
CCD可将荧光信号输出为数字信号的图像传感器,其内部具有光电转换作用的半导体器件,原理与PD一样,输出信号与荧光信号强度及曝光时间成正比。
CCD通常可用于350-1000nm波段的光学信号检测,从功能上分为线阵CCD和面阵CCD两大类。
其优点为检测精度高、光谱响应宽、量子效率高等,因此有学者将CCD图像传感器作为荧光生物传感器的检测器。
图4、电荷耦合器件
但CCD对光强分辨率低、背景信号高,同时内部由于热激励载流子产生暗电流,在温度较高的环境中,暗电流较大难以区分背景信号和荧光信号,从而影响检测精度。
目前在实验室内使用的商业化PCR仪通常采用灵敏度较高的PMT作为荧光信号检测器,而便携式设备中通常采用小巧实惠的PD作为检测器。
来源: IVD分享库
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