与传统抗体相比,重组抗体具有几个关键优势。这些包括卓越的批次间一致性,持续供应以及对抗体工程的适应性。因此,重组抗体在科学研究中的应用日益广泛,特别是作为解决持续存在的可重复性危机的一种手段。
什么是重组抗体? 传统的多克隆和单克隆抗体是正常 B 细胞发育和基因重组的产物。它们是通过用抗原免疫动物以引发免疫应答而产生的。多克隆抗体由许多不同的 B 细胞克隆分泌并识别多个抗原表位,而单克隆抗体则来自单个 B 细胞克隆,并且仅对一个表位具有特异性。 重组抗体是单克隆抗体,但是其生产涉及体外遗传操作。将抗体基因克隆到表达载体中后,将其转染到合适的宿主细胞系中进行抗体表达。哺乳动物细胞系最常用于重组抗体的生产,细菌、酵母或昆虫来源的细胞系也适用。重组抗体的特性如下:
卓越的批次间一致性
由于重组抗体的生产涉及对抗体轻链和重链进行测序,因此这是一个高度可控且可靠的过程。相反,用于生产单克隆抗体的基于杂交瘤的系统容易发生遗传漂移和不稳定,从而增加了批次间变异或抗体表达缺失的可能性。重组抗体在批次之间高度一致,从而确保了可重复的实验结果。
可扩展性
因为重组抗体所采取的体外生产抗体的方法适合大规模生产,意味着重组抗体的可获得性不太可能成为限制因素。此外,由于重组抗体序列是已知的,也确保了供应的连续性;对于要做大型长期研究的实验人员来说,这可能是一个特别关键的因素。
顺应工程化
了解抗体的肽序列为工程化提供了许多机会。这些包括同种型转换(也称为类转换)和种属转换,这两种方法都可以通过允许在组合中包含同种型或种属特定的二抗来增加多重实验的范围。工程学的进一步应用是使用体外抗体选择系统(例如抗体噬菌体展示)来改善抗体特异性。
无动物源性生产
与传统的抗体生产方法不同,重组方法避免了使用动物的需要。多克隆抗体直接从免疫宿主血清中纯化,单克隆抗体从杂交瘤来源的组织培养上清液 (TCS) 或腹水中纯化,而重组抗体是从转染宿主细胞系的 TCS 中纯化。
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