产品介绍：

PureCube Rho1D4 Agarose是针对Rho1D4标签膜蛋白的亲和层析产品，Rho1D4是一种含有9个氨基酸的长链亲和标记物(TETSQVAPA)，可用于高特异性亲和蛋白纯化。库柏生物的PureCube Rho1D4琼脂糖纯化树脂是为FPLC蛋白的纯化测定而制造的。具有Rho1D4标签的膜蛋白可以通过PureCube Rho1D4 Agarose，利用Rho-tag高特异性来纯化，它在蛋白质产量和纯度方面甚至胜过更常用的Flag-Tag标记。本产品由通过Rho1D4抗体进行功能化40 µm琼脂糖微球组成。德国Cube Biotech研发团队拥有逾40年经验在膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究经验，为您提供专用于膜蛋白纯化的Rho1D4系列高质量PureCube Rho1D4琼脂糖填料、磁珠和预装柱，以及具有较高流速XL琼脂糖同系列产品。



产品优势：
1）德国制造，欧美优质膜蛋白纯化产品供应商；
2）膜蛋白纯化的理想解决方案，可以获得纯净且活性的膜蛋白；
3）结合能力可高达3-4mg/mL；
4）高度特异性纯化带有标签的重组膜蛋白；
5）可重复再生使用；
6）良好的流量分布和小空隙体积；
7）兼容常用的色谱仪器；
8）配合Nanodisc使用，是目前非常有效的膜蛋白提取解决方案，数家科研院校正在使用；
9）高性价比的膜蛋白纯化产品！

 
产品详解：
对膜蛋白提取有高特异性和高产量
每个批次的PureCube凝胶均是按照严格的质量标准体系生产并严格检验，以确保每一批分装的产品都有高的蛋白结合能力。通过与特异性抗原表位相互作用，辅以优化过的纯化操作步骤，能使目标蛋白在洗脱组分中有高产出量。图1是对CXC趋化因子受体4(CXCR4)的纯化溶于Fos-Choline®-14的带标签蛋白通过大肠杆菌表达，再经由含PureCube Rho1D4琼脂糖的层析柱纯化。用Rho1D4多肽作为洗脱液，4次洗脱组分每毫升共收集到0.8mg、1.0mg、0.85mg和0.6mg目标蛋白。蛋白印迹结果说明CXCR4大约是65 kDa和35 kDa。这些条带是39.7 kDa膜蛋白的二聚体和单体。单体、二聚体的分离以及去除洗脱肽段，可以通过排阻层析的方法实现。
                                     

图1：用PureCube Rho1D4琼脂糖纯化CXCR4。
大肠杆菌裂解液（TL）溶解在Fos-Choline®-14中，溶解的组分（SF）与装有Rho1D4抗体的免疫亲和层析柱相结合。平衡组分中没有测得损失目标蛋白，经分光光度计测定，CXCR4在洗脱组分（E1-E4）中得浓度范围在0.6-1.0mg/mL。

           
表1：有文献报道的使用Rho1D4系统纯化膜蛋白的纯度和产率。

尽管很多用Rho1D4系统纯化的膜蛋白均为G蛋白偶联受体家族，该系统也可以有助于辨别其他如转运体之类的膜蛋白。 IAC：免疫亲和层析；SEC：排阻层析。
在20世纪80年代发现Rho1D4表位和配对抗体，当时通过将抗体偶联到Sepharose®上来纯化在猴肾细胞中表达的牛视紫红质。自此，Rho1D4系统（标签，偶联抗体的亲和基质，洗脱肽）开始用于少量膜蛋白的纯化，包括G蛋白偶联受体（GPCR），ATP结合转运体，溶质反向转运体和一个四次跨膜蛋白。

图2：假设有3个跨膜域的膜蛋白。Rho1D4标签加到膜蛋白C端，它的序列是T-E-T-S-Q-V-A-P-A

通过转基因修饰在目标膜蛋白的C端（或N端）加上Rho1D4标签（如图1）。一旦配有该序列，即可用装载有Rho1D4抗体的亲和基质捕获目标蛋白，并随后通过添加过量Rho1D4多肽，产生竞争性结合基质表面抗体来洗脱目标蛋白，用此方法洗脱比改变pH值等方式更加温和。
Rho1D4系统的一大优势是抗体与表位相互作用特异性非常高。而其另一大优势是洗脱目的蛋白收率相当高。利用Rho1D4纯化的目标蛋白可用于功能性研究，如：配体结合的特性，蛋白与蛋白间的相互作用。
*纯度是从低浓度经一步Rho1D4 IAC在反应溶液中得出的；产率是在洗脱成分浓缩并过SEC柱后计算。

 
技术参数：

相关产品:

1. 所有PureCube系列琼脂糖产品均提供用于自动液相色谱系统（如：FPLC）的预装柱（提供1mL）；

2. 用于稀释样品或用于pull-down实验，我们推荐使用PureCube Rho1D4 Magbeads磁珠；

3. Rho1D4抗体：这种抗体作为分离物质来生产PureCube的Rho1D4琼脂糖。也可以在Western Blot实验或者ELISA实验中检测rho-tagged蛋白；

4. Rho1D4多肽：在洗脱缓冲液中，Rho1D4多肽竞争结合到亲和层析凝胶上然后释放标签蛋白,相对于改变洗脱液的pH值来说提供了更温和的洗脱环境。Cube Biotech 提供了一系列的Rho1D4肽段，这些肽段已经被PureCube Rho1D4琼脂糖验证；

5. 配合Nanodisc产品使用，是有效的膜蛋白提取解决方案。

6. Rho1D4多肽可以单独购买，也可以购买PureCube Rho1D4试剂盒套装。详情请参见订货信息以及公司官网。

What our customers say:




订购信息:

成都正民德思生物科技有限公司致力于成为中国与世界生物技术产业的纽带，以务实的原则将欧洲高科技、高质量、高效能的产品引进中国。正民德思从2013年起至今，作为生物制药和体外诊断领域相关产品的供应商，秉承“为客户增值”的企业价值观提供优质的服务，通过对合作伙伴、客户及社会的契约责任的高度重视，已积累与中国、德国、西班牙、奥地利、美国、芬兰等众多知名生命科学企业、生物技术公司、制药公司、科研院校的合作经验，并获得合作伙伴和客户的高度认可并保持稳固的战略合作关系，互相支持、共同发展。

目前，成都正民德思生物科技有限公司作为德国蛋白纯化产品生产商/服务商Cube Biotech生物科技公司中国独家总代理、西班牙生物磁性分离设备制造商SEPMAG中国独家总代理、西班牙免疫诊断试剂研发服务商Pragmatic Diagnostics公司的中国独家战略合作方，在成都成立Cube Biotech、SEPMAG和Pragmatic Diagnostics的中国总部办事处，全权负责在中国地区的营销事务、销售及售后服务等所有工作。