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信号增强剂AO-1/AO-2
产品介绍
一、化学发光平台中的应用
1. 使用场景与效果
AO-1
适用体系:主要用于直接化学发光(CLIA) 和酶促化学发光(CLEIA)体系,尤其是辣根过氧化物酶(HRP)标记系统。
作用机制:通过胶束包裹荧光探针(如鲁米诺衍生物、吖啶酯),增强探针稳定性并降低背景干扰,提升光信号强度。
典型效果:在HRP-鲁米诺体系中,添加0.02-0.05% AO-1可使信号强度提升20-30%,同时缩短发光反应时间至5秒内。
用量:0.01-0.05%(w/v),过量可能导致胶束析出干扰检测。
注意事项:避免与高盐缓冲液(如Tris-HCl)同时使用,防止胶束稳定性下降。
AO-2
适用体系:更适用于碱性磷酸酶(ALP)标记的酶促化学发光体系,如AMPPD、APS-5、CDP-Star等底物系统。
作用机制:通过稳定胶束结构,促进ALP催化底物分解产生的激发态中间体释放光子,延长发光持续时间(达30-60分钟)。
典型效果:在ALP-AMPPD体系中,0.01-0.03% AO-2可提升灵敏度至10^-18 mol/L,适用于低丰度生物标志物检测(如肿瘤标志物CA125)。
用量:0.01-0.03%(w/v),高浓度可能抑制ALP活性(活性损失率>20%)。
注意事项:需控制pH在8.0-8.5,避免阳离子化导致静电聚集;避免高温保存(>37℃会加速酶失活)。
二、免疫比浊平台中的应用
1. 使用场景与效果
AO-1
适用体系:用于抗原抗体复合物稳定,防止大颗粒聚集导致的浊度信号波动。
效果:在免疫球蛋白(IgG)检测中,0.05% AO-1可使浊度信号线性范围拓宽至0.1-10μg/mL,减少非特异性吸附干扰。
用量:0.02-0.05%(w/v),过量会降低浊度灵敏度。
注意事项:需配合聚乙二醇(PEG)作为促聚剂(建议比例1:0.5),避免低温储存导致胶束析出。
AO-2
适用体系:更适合高离子强度环境(如含血浆样本)的浊度检测,通过抗静电作用维持复合物分散性。
效果:在C反应蛋白(CRP)检测中,0.02% AO-2可降低脂血样本的假阳性率(降幅达40%)。
用量:0.01-0.03%(w/v),需避免与阳离子表面活性剂(如CTAB)复配。
注意事项:在pH 7.4缓冲液中稳定性最佳,需通过DLS监控复合物粒径(目标范围50-200 nm)。
三、免疫层析平台中的应用
1. 使用场景与效果
AO-1
适用体系:胶体金标记试纸条中,用于胶体金颗粒的稳定分散,防止聚集导致的显色不均。
效果:在妊娠试纸中,0.1% AO-1可使胶体金标记抗体稳定性延长至12个月,显色灵敏度达10 mIU/mL hCG。
用量:0.05-0.1%(w/v),需结合牛血清白蛋白(BSA)封闭非特异性位点。
注意事项:避免与高浓度盐(如NaCl>0.5 M)共用,防止胶体金聚集。
AO-2
适用体系:荧光微球层析试纸条中,作为探针保护剂,增强荧光信号稳定性。
用量:0.02-0.05%(w/v),需配合Triton X-100(0.1%)增强穿透性。
注意事项:需验证AO-2对荧光探针猝灭效应(建议通过荧光寿命检测)。
四、不同发光物质的选择建议
直接化学发光(吖啶酯):AO-1 + 异鲁米诺;快速检测(如急诊心肌标志物);发光快(10秒内达峰),适合POCT
酶促化学发光(ALP):AO-2 + AMPPD/APS-5;高灵敏度检测(如肿瘤标志物);长发光时间(30-60分钟),适合实验室
电化学发光(三联吡啶钌):AO-1 + TPA;高通量自动化检测(如全自动化学发光仪);灵敏度最高(10^-20 mol/L),抗干扰强
信号增强剂AO-1/AO-2_表面活性剂_生物化学_产品_深圳市柏雷丁生物有限公司 (braveds.com)
深圳市柏雷丁生物有限公司
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