Heat&Run gDNA Removal kit                              

基因组DNA（gDNA）去除试剂盒                 

描述

逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和定量RT-qPCR（RT-qPCR）是检测和定量RNA常用的方法，广泛应用于分子研究和临床诊断领域。但这两种方法的问题是不能区分cDNA和基因组DNA，这可能导致假阳性出现；在RT-qPCR中，RNA定量也会出现问题。

在RT-qPCR中，基因组DNA污染有多个可能的来源。其中，最常见的来源之一是用于RNA提取的细胞。通常，PCR引物都是跨内含子设计的，目的是特异性地扩增cDNA。除非内含子长度足够，否则污染的gDNA仍可能竞争结合引物和探针，从而导致假阳性。此外，经过处理的假基因也可能是假阳性的一个重要来源。这些假基因不含内含子，与cDNA序列相同。因此，在RT-PCR和RT-qPCR中，在扩增前去除任何污染DNA都是必须的。

从RNA中去除基因组DNA污染最常用的方法之一是DNase I处理，而65℃灭活DNase I的同时会损失目的RNA。我们推出一款简便、快捷的方法——Heat&Run gDNA去除试剂盒，基于HL-dsDNase具有的低温活性及热不稳定性等优点，——室温孵育去除gDNA污染，升温到50℃灭活HL-dsDNase，同时激活反转录酶活性。

优势

1.     gDNA去除与反转录（RT）可在同一支管中完成，提高RNA得率；

2.     得到高纯度RNA进行qPCR；

3.     兼容市售绝大多数RT试剂盒；

4.     操作简便，减少操作次数，降低污染风险；

5.     特别适合高通量实验。

推荐应用

1.     RT-PCR及RT-qPCR应用；

2.     单细胞RNA测序；

3.     Trizol法分离RNA。

组分及特性

1.     HL-dsDNase：双链特异性DNA酶，具有低温活性及热不稳定性；58℃、5分钟，不可逆失活；

2.     10x Reaction Buffer：提供HL-dsDNase酶切体系。

使用指导

与传统的DNase I处理相比，gDNA去除试剂盒操作简单、快速高效、gDNA去除彻底且提高RNA得率。

数据

gDNA去除不影响mRNA定量

Figure 1. 用gDNA去除试剂盒处理SDHA（mRNA）及gDNA两个实验组，对照组不用试剂盒处理。用RT-PCR定量分析。

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